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水即生命-浅谈细胞培养中的超纯水-仪器1号网

  

 

       比如细菌、酵母或霉菌等。这些污染物通常肉眼可见,或者在光学显微镜下可见。然而,化学来源的污染物或其它生物媒介也可能会影响所培养细胞的生长、形态学或细胞行为,但是无法用裸眼检测到细胞培养用水的污染来源有很多种。 

       因此细胞培养的用水必需不含微生物,尤其是内毒素、无机离子(重金属,如铅、锌等)或有机复合物(腐殖酸,单宁酸,杀虫剂等)自来水(龙头水)中典型的杂质和用于细胞培养的目标值如表1所示。

       本研究中,以即用型CDM4PERMabHyclone培养基来培养PER.C6EpCA M细胞作为对照,同时分别用A riumproUF生产进去的水(UF水)和RO水来配制CDM4PERMabHyclone粉末培养基。本应用指南中所使用的RO水数据是通过新一代A rium高级系统的旧款模型(A riumRO而获得的每个培养批次的结果用于评估由A riumproUF系统生产的水是否适合用于PER.C6EpCA M细胞的培养。本实验中所使用的PER.C6细胞系来源于人成视网膜细胞,如今也应用于重组蛋白的表达和单克隆抗体(Mab生产)制备,以及用于治疗性蛋白和单克隆抗体的生产。

 

结论

 

       本实验结果清楚地显示了用UF水配制的粉末培养基(CDM4PERMab培养基)比市场上在售的即用型培养基更加适合PER.C6EpCA M细胞系的培养。PER.C6EpCA M细胞系在用UF水配制的培养基中培养后的生长特征与对照组中用即用型CDM4PERMab培养基培养后的特征相似。

       此外,还观察到当实验在SpinnFlasks中进行时,细胞系样品在用UF水配制的培养基中培养与用RO水配制的培养基中培养相比,细胞生长更加良好。这项实验中,细胞密度基本都变得很高,而O2不再是限制性因素。因此我得出结论,RO水中因为有更高浓度的内毒素或无机盐,因此影响了细胞生长。

       这些实验结果都通过在SpinnerFlasks中培养PER.C6EpCA M细胞系而获得的单抗产量得到进一步验证与体现。PER.C6EpCA M细胞系在用A riumproUF超纯水配制的培养基样品中培养能够获得最高的单抗产量,对照组(使用即用型培养基)产量稍低。这两种情况的单抗产量都不同于RO水样品,RO水样品中培养后单抗产量反而下降。

       综上,总结出A riumproUF系统是最适合用于PER.C6EpCA M细胞系的细胞培养的因为该水系统将水中的杂质含量降到最低,如无机离子,有机化合物等,尤其是将内毒素含量降至极为痕量的水平。

 

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